美國傳媒報道，懷疑槍手是29歲的馬丁(Omar Mateen)，父母來自阿富汗，馬丁相信是在美國出生，一家住在佛州聖路西港(Port St. Lucie)，離奧蘭多200公里，相當於2至3小時車程。根據美國廣播公司報道，疑兇雖然為執法部門所認識，但沒有刑事紀錄，也不屬於專門調查對象。 介入調查的聯邦調查局霍帕(Ronald Hopper)表示，有迹象顯示疑犯「有『伊斯蘭國』(ISIS)武裝分子傾向」，但強調仍須進一步調查。馬丁的一名親屬表示，馬丁一家在被告知馬丁行兇後都感到震驚，並對事件感到遺憾。 馬丁的父親隨後向傳媒表示，兒子曾在他面前公開表達對同性戀者的不滿，相信事件是憎恨同志所觸發，與宗教無關。
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